近日,鄭州某大學課題組需要對新生大鼠的心臟組織進行研磨前處理實驗操作,這不凈信知道后立刻就拿出了自家的爆款產(chǎn)品—單細胞懸液制備儀,助力實驗課題組對乳鼠心臟組織的前處理實驗應用。
實驗目的:新生大鼠1-3的心臟組織,需要提取樣品組織的心肌細胞和成纖維細胞,以便后續(xù)用于加藥研究。
實驗準備:
1.實驗耗材:儀器配套的2ml研磨罐和70μm過濾管
2.實驗樣品:新生第2天的乳鼠
3.實驗儀器:4通道的單細胞制備儀
乳鼠心臟組織單細胞懸液制備的實驗步驟:
1.在實驗開始前,需要把儀器配套的組織消化液及終止液提前從-20℃冰箱取出,用冷水將其解凍備用
2.取75%酒精消毒器材后,解剖乳鼠取出心臟組織,先將其在預冷的Dhanks溶液中,然后用眼科鑷眼科剪剪碎成1mm以下的顆粒,然后轉(zhuǎn)移至2ml研磨罐中,加滿消化酶,纏封口膜
3.將其放置于儀器37℃預熱的管架中孵育5min,然后轉(zhuǎn)移至運行模塊中,合上儀器蓋,選擇程序3啟動運行 20min
4.帶儀器程序運行結束后,即可取出樣品離心管,取出觀察組織塊已經(jīng)幾乎消化成渾濁的細胞懸液,如下圖
5.用70μm的濾網(wǎng)過濾細胞,加入2倍的終止液終止消化,1000rpm離心5min,取出棄上清,可明顯看到沉于底部的單細胞,加入培養(yǎng)基置于37攝氏度培養(yǎng)箱培養(yǎng)
單細胞制備儀對乳鼠心臟組織單細胞制備的實驗效果由上圖可看出,細胞懸液的消化效果較好,細胞量足,可滿足客戶的實驗需求。