根據(jù)用戶實(shí)驗(yàn)需求,此次實(shí)驗(yàn)取小鼠視網(wǎng)膜作為樣品組織,對(duì)其進(jìn)行制備獲取單細(xì)胞懸液,以便進(jìn)行后續(xù)的單細(xì)胞測(cè)序
實(shí)驗(yàn)設(shè)備:單細(xì)胞懸液制備儀 JX-CKSM-4WK
制備小鼠視網(wǎng)膜單細(xì)胞懸液的實(shí)驗(yàn)操作步驟:
1.在實(shí)驗(yàn)開始前,需要提前準(zhǔn)備好單細(xì)胞制備儀一臺(tái),實(shí)驗(yàn)耗材以及小鼠樣本等
2.把實(shí)驗(yàn)用到的消化酶和終止液進(jìn)行提前冰浴解凍
3.打開熱板加熱和模塊加熱,將設(shè)備加熱到37℃
4.小鼠處死后,在顯微鏡下的幫助下取出小鼠視網(wǎng)膜
5.把小鼠視網(wǎng)膜經(jīng)過DPBS清洗后,放入消化管中,再加入消化酶,上機(jī)靜置3min后使用程序2進(jìn)行消化
6.待儀器程序結(jié)束后取出,即可使用40μm篩網(wǎng)過濾
7.進(jìn)行后續(xù)實(shí)驗(yàn)的離心、裂紅、重懸
實(shí)驗(yàn)操作注意事項(xiàng):
1.清洗使用沒有Ca2+和Mg2+離子的DPBS
2.需要在實(shí)驗(yàn)開始前提前將儀器加熱,把酶和終止液提前解凍
3.后續(xù)做單細(xì)胞測(cè)序的單細(xì)胞懸液過濾需要使用40μm篩網(wǎng)進(jìn)行應(yīng)用
實(shí)驗(yàn)操作圖:
小鼠視網(wǎng)膜單細(xì)胞懸液制備的實(shí)驗(yàn)結(jié)果圖(臺(tái)盼藍(lán)鏡檢):